小鼠避暗(àn)儀(yí)的實(shí)驗方法(fǎ)
實驗(yàn)準備
熟(shú)悉環(huán)境：實驗(yàn)前2天使(shǐ)小(xiǎo)鼠(shǔ)熟(shú)悉實驗室(shì)環境(jìng)，自由飲食，攝水。
分組設(shè)計：按(àn)分(fēn)層隨機區組設計(jì)，使(shǐ)各組動物平均(jūn)體(tǐ)重(zhòng)和(hé)性別(bié)比(bǐ)例(lì)相似。實(shí)驗小鼠按訓練(liàn)方法(fǎ)不(bù)同分為(wéi)單次適(shì)應單次電擊(jī)（MOS），單次(cì)適應(yīng)限時訓練(liàn)（MOL），多次適應(yīng)限(xiàn)時訓練（MUL）3組，每(měi)組根據給藥不(bù)同分為對(duì)照（C）和模型(xíng)（M）兩個亞(yà)組(zǔ)，最後共6組（每(měi)組(zǔ)n=9）。
儀(yí)器(qì)設置(zhì)：避(bì)暗(àn)儀(yí)分為明，暗(àn)兩室，其間(jiān)有一(yī)直(zhí)徑(jìng)為3cm的圓洞，兩(liǎng)室底(dǐ)部均鋪以(yǐ)銅(tóng)柵(zhà)。暗室(shì)底(dǐ)部(bù)銅柵可通(tōng)電，電壓通(tōng)過按(àn)鈕調節(jié)，一般(bān)為40V，50Hz。
訓練(liàn)方(fāng)法
MOS法：訓練在(zài)一天(tiān)內(nèi)完(wán)成，先(xiān)將小(xiǎo)鼠放(fàng)入(rù)避暗(àn)儀(yí)中(zhōng)適(shì)應環(huán)境3min，訓(xùn)練時(shí)將(jiāng)小鼠(shǔ)背(bèi)對(duì)洞(dòng)口放(fàng)入明(míng)室(shì)內(nèi)，其進(jìn)入(rù)暗室受到(dào)電擊即(jí)取出。
MOL法：訓練(liàn)在(zài)一天內完(wán)成，小鼠適應(yīng)環(huán)境(jìng)3min，訓練(liàn)3min。
MUL法：連(lián)續(xù)3天在(zài)同一時間(jiān)將小鼠(shǔ)放(fàng)入(rù)避暗儀中適(shì)應3min，第三天適(shì)應完成(chéng)後(hòu)開(kāi)始訓練(liàn)，3min後(hòu)取(qǔ)出(chū)。適應(yīng)環境(jìng)和訓(xùn)練時任(rèn)小(xiǎo)鼠在明室和暗室之(zhī)間(jiān)自由(yóu)穿梭，步(bù)入潛伏(fú)期大(dà)於3min者(zhě)棄(qì)去不用。
測試方(fāng)法
記(jì)錄(lù)指標：訓(xùn)練完(wán)成(chéng)24h後(hòu)將(jiāng)小(xiǎo)鼠再(zài)次(cì)放入(rù)明室，記(jì)錄(lù)其(qí)第(dì)一(yī)次進入暗室所需的(dí)時間，即步入潛伏期(qī)（STL）和5min內(nèi)進入(rù)暗室(shì)的次(cì)數，即錯誤次數（ETs）。若5min內小鼠(shǔ)未進(jìn)入暗(àn)室(shì)則(zé)STL記為300s，ETs記為(wéi)0。
注(zhù)意事項(xiàng)
實驗環境
環境(jìng)清(qīng)理：實驗前(qián)後注意清理點擊(jī)柵(zhà)欄動(dòng)物(wù)排泄物，排泄(xiè)物(wù)會影(yǐng)響通電性(xìng)。通(tōng)過酒精(jīng)擦拭(shì)，晾幹(gān)盡(jìn)可能(néng)去除(chú)上一(yī)隻動(dòng)物(wù)氣味，儀器(qì)設備需具(jù)備(bèi)通風(fēng)係統(tǒng)。
減(jiǎn)少(shǎo)幹(gān)擾：在(zài)實驗過程中必(bì)須(xū)保持所有實驗程序(xù)一(yī)致，如屏(píng)蔽噪音(yīn)，減少(shǎo)氣味(wèi)刺激(jī)，調節(jié)光綫等(děng)，實驗環境應(yīng)該(gāi)安靜(jìng)，昏(hūn)暗(àn)，盡(jìn)量輕(qīng)巧抓(zhuā)取動物，減(jiǎn)少對動物(wù)的(dí)刺(cì)激。關(guān)閉兩箱中間(jiān)的門時要輕(qīng)柔(róu)，不要(yào)製造(zào)過多外(wài)界(jiè)的(dí)聲(shēng)響影(yǐng)響動物(wù)行為(wéi)。
實(shí)驗(yàn)操(cāo)作(zuò)
動(dòng)物(wù)適應：實(shí)驗開(kāi)始前(qián)3-7天，每天(tiān)抓(zhuā)取，輕撫(fǔ)動物(wù)，讓其(qí)適應(yīng)被實驗(yàn)人(rén)員抓(zhuā)取(qǔ)，避免實驗過程(chéng)中(zhōng)因實(shí)驗(yàn)人員抓取而(ér)造成(chéng)動物處(chǔ)於(yú)應激(jī)狀(zhuàng)態(tài)，造成(chéng)實驗結(jié)果不(bù)可靠的問題。
電(diàn)擊參(cān)數：大(dà)鼠電流(liú)為0.65-1.8mA（推(tuī)薦(jiàn)0.8mA），或電(diàn)壓(yā)65-70V；小鼠電流(liú)為0.15-0.6mA（推薦0.25mA），或電(diàn)壓(yā)30-36V，頻(pín)率(shuài)為5-15Hz電(diàn)流(liú)。
設備維(wéi)護：實(shí)驗儀(yí)器底部的銅(tóng)柵(zhà)容易(yì)生鏽(xiù)，導(dǎo)致(zhì)電(diàn)阻增(zēng)加，每次實(shí)驗(yàn)前(qián)，應(yīng)以砂紙打(dǎ)磨(mó)光滑。
