此類(lèi)方(fāng)法(fǎ)主要(yào)是(shì)利(lì)用(yòng)大鼠畏(wèi)水及(jí)在水中無(wú)法進(jìn)入睡眠(mián)的生活習性，通過(guò)在盛水(shuǐ)的(dí)水槽中(zhōng)放(fàng)置(zhì)平台，讓大鼠站立在(zài)平台(tái)上，因平(píng)台(tái)直徑足夠小(直徑 6.5 cm 或更小(xiǎo))當(dāng)大鼠進(jìn)入(rù) REM 時，因(yīn)全(quán)身肌張力降低(dī)引起節(jié)律(lǜ)性(xìng)低頭(tóu)觸(chù)水(shuǐ)以此來(lái)達(dá)到剝奪 REM 的目的(dí)， 此類(lèi)方法(fǎ)簡(jiǎn)單(dān)易(yì)行(háng)無(wú)需復雜(zá)昂(áng)貴的設備，在不(bù)同條件的實驗(yàn)室均能(néng)開展(zhǎn)因而應(yīng)用廣(guǎng)泛(fàn) 其(qí)主要(yào)用來(lái)剝奪大(dà)鼠(shǔ)的(dí)REM ，可(kě)分(fēn)為(wéi)以(yǐ)下(xià)三種方法：

 

1.1單平(píng)台睡(shuì)眠剝(bāo)奪法

 

此(cǐ)方(fāng)法*早於(yú) 1964 年被應用在貓的睡(shuì)眠剝(bāo)奪實驗中(zhōng)，不(bù)久(jiǔ)以(yǐ)後有人(rén)將此方法應用於大鼠的睡(shuì)眠剝(bāo)奪實驗(yàn)，，方(fāng)法為(wéi)將(jiāng)一圓柱形小平台 (直徑(jìng)約 65 m m )放(fàng)置在(zài)長 400 mm寬340 m m高(gāo)160 mm的水槽中，往(wǎng)水(shuǐ)槽中(zhōng)加水至平台露出水(shuǐ)麵(miàn)約 10 mm ，將(jiāng) 1 隻(zhī)大(dà)鼠置(zhì)於小(xiǎo)平(píng)台(tái)上，大(dà)鼠(shǔ)可在平台上站立，可進入 NREM，當大鼠(shǔ)進入(rù) REM 時(shí)全(quán)身骨骼(gé)肌(jī)張(zhāng)力(lì)明顯(xiǎn)降(jiàng)低(dī)，頸部肌(jī)張力降低引起(qǐ)節律性低(dī)頭觸(chù)水(shuǐ)從(cóng)而無(wú)法進(jìn)入 REM，采(cǎi)用 SP 實驗可(kě)引起動物的體重及(jí)胸腺重量減輕，腎上腺重量增(zēng)加，血漿中腎上腺皮(pí)質酮增(zēng)加，動物(wù)攻(gōng)擊(jī)行(háng)為增加(jiā)，機(jī)體**反應抑(yì)製(zhì)等(děng)。

 

因(yīn) SP 是(shì)單(dān)隻(zhī)大鼠進(jìn)行實(shí)驗且在實(shí)驗中(zhōng)大(dà)鼠(shǔ)的活(huó)動(dòng)空(kōng)間受(shòu)限(xiàn)，故有學(xué)者(zhě)認為以上(shàng)的(dí)臨床(chuáng)與(yǔ)實(shí)驗(yàn)室(shì)表(biǎo)現可能與(yǔ)大(dà)鼠(shǔ)的群(qún)體(tǐ)隔(gé)離或(huò)活動空間(jiān)受限(xiàn)有關(guān)，進一步(bù)研(yán)究發現，在實驗前(qián)群(qún)體(tǐ)飼(sì)養(yǎng)的(dí)動物(wù)當與群體隔離(lí)後也會(huì)出現攻(gōng)擊(jī)行(háng)為增加，血漿(jiāng)中 CORT 增加，**功能抑製(zhì)等(děng)表(biǎo)現。大鼠活(huó)動空(kōng)間受限也(yě)可(kě)引起血漿(jiāng)中(zhōng) CORT 的(dí)水(shuǐ)平的(dí)增加，這(zhè)些結果與單平台睡(shuì)眠剝(bāo)奪實驗中(zhōng)見到的(dí)類(lèi)似，為克服SP 中(zhōng)大鼠與(yǔ)群體分離(lí)及活動(dòng)空間(jiān)受限的缺點，在(zài) SP 基礎上(shàng)進(jìn)一(yī)步發(fā)展(zhǎn)為多(duō)平台睡眠(mián)剝奪(duó)法。

 

1.2多(duō)平台睡眠(mián)剝(bāo)奪法

 

M P法於1981年*先(xiān)應用(yòng)在大鼠(shǔ)睡(shuì)眠(mián)剝奪實(shí)驗中，在 M P中為擴展(zhǎn)大鼠(shǔ)的活動(dòng)空(kōng)間(jiān)將小平(píng)台(tái)由 SP 中(zhōng)的 1 個增加(jiā)至 7 個(gè)，仍(réng)將1隻(zhī)大鼠(shǔ)放(fàng)在小(xiǎo)平台間進行睡眠(mián)剝(bāo)奪試(shì)驗(yàn)，因(yīn)大鼠(shǔ)可以(yǐ)在 7個(gè)小平台(tái)間自由活動，故活動範圍(wéi)較 SP 中有明(míng)顯增(zēng)大(dà)。經實驗比較(jiào)，在M P中(zhōng)反(fǎn)映(yìng)應(yīng)激(jī)增強的一(yī)些指(zhǐ)標，如腎上腺(xiàn)重(zhòng)量增加和胸(xiōng)腺重量(liáng)減(jiǎn)少仍然(rán)存在(zài)，甚(shèn)至在(zài)大鼠血液中(zhōng) ACTH %CORT 的增加及(jí)腎上(shàng)腺(xiàn)重量的增加較SP的(dí)更高，提示 M P較(jiào)SP有更強的(dí)應(yīng)激(jī)性(xìng)!考慮到(dào)大鼠(shǔ)為群居動物(wù)，單隻(zhī)大鼠(shǔ)實驗易(yì)導(dǎo)致(zhì)與所在(zài)群(qún)體的隔離(lí)。為(wéi)克服群(qún)體(tǐ)隔離所帶來(lái)的應激反應，有(yǒu)學(xué)者(zhě)將 M P 法(fǎ)進(jìn)一步改(gǎi)良發展(zhǎn)為改良(liáng)多平台睡眠(mián)剝奪法!

 

1.3改良(liáng)多平(píng)台(tái)睡(shuì)眠(mián)剝奪法

 

在(zài)MMPM 中將 10 隻大鼠(shǔ)(具體數(shù)目可根(gēn)據實(shí)際(jì)需要(yào)確(què)定)同(tóng)時放(fàng)在裝有 14 或 15 個小平台(tái)的(dí)水(shuǐ)槽中(長 127 cm ，寬(kuān) 44 cm ，高 45 cm )進行實驗，這(zhè)樣(yàng)既避(bì)免(miǎn)了 SP及(jí)M P中(zhōng)單(dān)隻(zhī)大鼠(shǔ)與群(qún)體(tǐ)隔離的(dí)缺(quē)點，又(yòu)保(bǎo)留了 M P 中活動範(fàn)圍(wéi)增大的特點(diǎn)，因(yīn)在實(shí)驗(yàn)時(shí)大鼠多是(shì) 3 隻(zhī)或(huò) 4 隻(zhī)一籠(lóng)進(jìn)行飼養，如 1 組實(shí)驗(yàn)需(xū) 10 隻大(dà)鼠，則需(xū)要3籠(lóng)或(huò) 4籠大(dà)鼠，考(kǎo)慮到(dào)來自不同籠的大鼠放在(zài)一起(qǐ)實驗也可能(néng)造(zào)成群(qún)體的(dí)不穩定(dìng)，有(yǒu)學(xué)者(zhě)將實驗方法進(jìn)一(yī)步改(gǎi)良(liáng)，將實驗(yàn)所需(xū)的 10 隻大(dà)鼠(shǔ)放(fàng)在同一(yī)隻(zhī)籠中飼(sì)養(yǎng) 2 周，實(shí)驗(yàn)時再將這些(xiē)大(dà)鼠(shǔ)放在(zài)一起同(tóng)時(shí)進(jìn)行(háng)睡(shuì)眠剝奪實(shí)驗，這(zhè)樣(yàng)以(yǐ)克(kè)服(fú)實驗時(shí)大(dà)鼠群(qún)體不穩定(dìng)的(dí)缺點(diǎn)，從而(ér)將實驗時的不(bù)確定因素(sù)減(jiǎn)至(zhì)*低! 實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)在(zài)MMPM中"經采(cǎi)取措(cuò)施保(bǎo)持大鼠(shǔ)群體(tǐ)穩(wěn)定(dìng)性(xìng)及(jí)避(bì)免大鼠與(yǔ)群體(tǐ)分離後(hòu)" 大鼠腎上(shàng)腺重量%體重(zhòng)減(jiǎn)輕量%血清(qīng)中(zhōng)促腎上腺(xiàn)皮質**(A CTH )和腎上(shàng)腺(xiàn)皮(pí)質酮 (CO RT) 的含量均較(jiào)M P中為低(dī)，提(tí)示M M PM 較(jiào) M P 具有更(gēng)低的應(yīng)激(jī)性(xìng)，是(shì)較(jiào)為理想的REM 剝(bāo)奪方法。

 

2強迫(pò)運(yùn)動睡(shuì)眠(mián)剝奪法

 

此類睡眠(mián)剝(bāo)奪方法形(xíng)式(shì)多樣，在腦電(diàn)監(jiān)護(hù)情(qíng)況(kuàng)下(xià)可行(háng)全部(bù)的睡眠剝奪和選擇(zé)性的睡眠(mián)剝奪。其共(gòng)同特(tè)點(diǎn)是通過動力(lì)裝(zhuāng)置(zhì)迫使大(dà)鼠不停(tíng)地運(yùn)動，從而達到睡(shuì)眠剝奪(duó)的目的(dí)。此(cǐ)類方(fāng)法(fǎ)的(dí)優(yōu)點是(shì)睡眠剝(bāo)奪效果明(míng)顯，睡眠(mián)剝奪(duó)的(dí)時間(jiān)及強度(dù)易(yì)於(yú)掌(zhǎng)握，重(zhòng)復(fù)性好(hǎo)，無(wú)須(xū)實驗人(rén)員隨(suí)時觀察(chá)實驗情(qíng)況，減輕(qīng)了實(shí)驗人員(yuán)工(gōng)作強(qiáng)度。缺(quē)點是長(cháng)時間(jiān)運(yùn)動引(yǐn)起(qǐ)機(jī)體(tǐ)的(dí)一係(xì)列應激反應(yīng)可能(néng)幹擾(rǎo)睡(shuì)眠剝(bāo)奪(duó)的(dí)實(shí)驗(yàn)結果(guǒ)，現(xiàn)選(xuǎn)取其(qí)中兩種有代表(biǎo)意(yì)義的(dí)方法(fǎ)介(jiè)紹如(rú)下(xià)

 

2.1水平(píng)轉(zhuǎn)盤睡眠剝(bāo)奪(duó)法

 

此方(fāng)法應用廣泛(fàn)，於 1983 年*先(xiān)應用在(zài)睡眠剝(bāo)奪(duó)實驗中，實驗(yàn)裝(zhuāng)置由一(yī)個電(diàn)腦(nǎo)控(kòng)製台(tái)，一(yī)個(gè)水(shuǐ)平(píng)轉(zhuǎn)盤及兩個(gè)開放(fàng)的長方形有(yǒu)機(jī)玻璃(lí)缸組(zǔ)成，轉盤(pán)直徑(jìng)為 46 cm，在電腦(nǎo)控(kòng)製下可以(yǐ)按順時針逆時(shí)針(zhēn)方(fāng)向(xiàng)隨(suí)機(jī)水平轉(zhuǎn)動! 兩隻(zhī)有機(jī)玻(bō)璃缸(gāng)的(dí)尺(chǐ)寸均為(wéi)長60 cm ，寬20.5 cm，高(gāo) 60 cm 。在(zài)距離缸底 5 cm 處的缸側(cè)壁開有一條縫(féng)隙，使轉(zhuǎn)盤的一半能分別從(cóng)縫(féng)隙(xì)伸(shēn)入(rù)兩(liǎng)隻玻(bō)璃缸(gāng)中(zhōng)並(bìng)能隨意轉(zhuǎn)動。缸底留置水約(yuē) 2 cm 深，轉盤離(lí)水麵約(yuē)3 cm 實(shí)驗前1周(zhōu)將睡眠剝(bāo)奪大鼠頭頸部植(zhí)入微電極(jí)" 並(bìng)將微電極(jí)與電腦(nǎo)控(kòng)製台相(xiāng)連，將大鼠放在轉盤(pán)上適應(yīng)環境1周，每(měi)天(tiān)約1 h讓大鼠(shǔ)習慣在(zài)轉盤(pán)上活動(dòng)，進水，進(jìn)食等。實驗時將實(shí)驗組的(dí)大鼠(shǔ)及對照(zhào)組的大鼠分別(bié)置於(yú)兩(liǎng)隻(zhī)缸中(zhōng)的轉盤上(shàng)，當電(diàn)腦(nǎo)通過微(wēi)電(diàn)極監測到實驗組(zǔ)大(dà)鼠(shǔ)進入慢波或快波(bō)睡(shuì)眠的(dí)腦(nǎo)電信號後，立即發(fā)出(chū)指令使轉盤轉動(dòng) 6 s(6 s內轉動 1/3 圈(quān))，當(dāng)大(dà)鼠被轉(zhuǎn)到玻璃缸(gāng)壁時(shí)，因被玻璃缸(gāng)壁(bì)擋(dǎng)住(zhù)而可能(néng)掉(diào)入水中，每(měi)次在(zài)實(shí)驗(yàn)組(zǔ)睡(shuì)眠剝(bāo)奪大鼠(shǔ)進入睡(shuì)眠時轉盤即(jí)轉動 6 s，方向(xiàng)隨機，轉盤(pán)轉動時兩(liǎng)隻大(dà)鼠均被動地(dì)隨著(zhuó)轉(zhuǎn)盤(pán)移動(dòng)。此方(fāng)法(fǎ)一次隻(zhī)剝奪一(yī)隻(zhī)大鼠(shǔ)睡(shuì)眠，當實驗(yàn)組(zǔ)的(dí)睡(shuì)眠剝奪大(dà)鼠在活動，進水，進食時轉盤並(bìng)不(bù)轉(zhuǎn)動而(ér)此(cǐ)時對照(zhào)組(zǔ)的大鼠(shǔ)則(zé)可趁機睡(shuì)覺(jué)以彌補被剝(bāo)奪(duó)的(dí)睡(shuì)眠(mián)。此(cǐ)方(fāng)法中(zhōng)睡(shuì)眠剝奪(duó)組(zǔ)大鼠與(yǔ)對照(zhào)組(zǔ)大鼠條(tiáo)件(jiàn)極(jí)其(qí)相似，因而(ér)可減少因實(shí)驗(yàn)條件(jiàn)不同而(ér)所致(zhì)的應激反(fǎn)應。

 

2.2旋(xuán)轉(zhuǎn)圓筒(tǒng)睡眠剝奪法

 

此方法(fǎ)於 1979 年*先應(yīng)用(yòng)於睡(shuì)眠(mián)剝奪實驗中，設備主要由(yóu)一(yī)柱(zhù)形圓筒及一小(xiǎo)型(xíng)慢速(sù)馬達(dá)構成(chéng)。圓(yuán)筒(tǒng)直徑(jìng) 30 cm，高 30 cm 。圓筒(tǒng)底由(yóu) PVC (聚(jù)氯(lǜ)乙烯(xī))構(gòu)成(chéng)，側(cè)壁由直(zhí)徑(jìng)為(wéi) 10.4 m m 的(dí) PVC 杆圍成。杆(gān)長度 30 cm，杆之間(jiān)間隔 15.5 m m，圓筒與小型(xíng)馬達(dá)相(xiāng)連。馬達轉速為(wéi)每(měi) 45 s轉(zhuǎn) 1 圈(也(yě)有學(xué)者應用每 m in 轉 1 圈(quān))。至少在(zài)實驗(yàn)前(qián) 2 d每天將大鼠放入圓筒(tǒng)中適應(yīng)環(huán)境 1 次，適(shì)應(yīng)時(shí)間(jiān)不少(shǎo)於(yú) 3 h。實(shí)驗時(shí)將(jiāng)馬達按 45 s每(měi)1 圈進行匀速(sù)轉動(dòng)，通(tōng)過(guò)圓筒(tǒng)的轉(zhuǎn)動帶動(dòng)大(dà)鼠不停運(yùn)動(dòng)而達到(dào)睡眠(mián)剝奪(duó)的目(mù)的。此類(lèi)方法(fǎ)簡單易(yì)行，睡(shuì)眠剝奪效(xiào)果明顯。缺點是(shì)長(cháng)時(shí)間(jiān)不停運動(dòng)可引(yǐn)起(qǐ)機體的運動(dòng)後(hòu)應激(jī)反應及身體(tǐ)疲(pí)勞，可能(néng)幹(gān)擾睡眠剝奪(duó)實驗結果! 此類(lèi)方(fāng)法(fǎ)發(fā)展出(chū)多種變(biàn)化(huà)，有實驗者在進(jìn)行(háng)新(xīn)生大鼠睡眠剝奪(duó)時將(jiāng)筒旋轉速(sù)調節(jié)至(zhì) 2~3 r/m in後(hòu)期逐(zhú)漸(jiàn)增(zēng)加至 6~7 r/m in。

 

3輕柔刺激(jī)法(fǎ)

 

此方法在短期的睡眠剝奪實(shí)驗中(zhōng)應用(yòng)較多，當(dāng)實驗人員(yuán)通(tōng)過觀察大(dà)鼠行為(wéi)或通(tōng)過(guò)腦電波(bō)監(jiān)護(hù)觀察(chá)到大鼠(shǔ)進(jìn)入睡眠時，通過(guò)輕輕拍打大鼠(shǔ)籠子(zǐ)或(huò)應用(yòng)聲(shēng)音，光綫的(dí)刺(cì)激促(cù)使(shǐ)大(dà)鼠(shǔ)保(bǎo)持(chí)清(qīng)醒(xǐng)，必(bì)要時(shí)還可(kě)用紙卷，鉛筆或用(yòng)手(shǒu)直(zhí)接觸摸(mō)大鼠(shǔ)使(shǐ)大(dà)鼠無法(fǎ)進入睡眠(mián)。注意(yì)不能(néng)將大(dà)鼠移出(chū)籠(lóng)外!此方法簡單(dān)易行(háng)，在腦電監護(hù)情況(kuàng)下可進行 TSD 或 SSD 實驗，在無(wú)腦(nǎo)電(diàn)監護時需要實驗人員在旁不(bù)間斷(duàn)觀(guān)察(chá)大鼠(shǔ)行為，故較適(shì)合行(háng)短(duǎn)時(shí)間的睡眠剝奪(duó)實(shí)驗(yàn)。

 

4**睡眠剝奪法

 

定(dìng)時(shí)給(gěi)大鼠注(zhù)射**， 此(cǐ)類(lèi)方法簡(jiǎn)單易(yì)行，操(cāo)作方便(biàn)，不需(xū)要特殊(shū)儀器。缺點是大(dà)鼠存在(zài)個體差(chà)異， 睡眠剝奪(duó)的效果(guǒ)及程(chéng)度(dù)及(jí)不易掌(zhǎng)握。多(duō)用(yòng)在(zài)研究(jiū)某些(xiē)特(tè)殊(shū)**藥(yào)理(lǐ)作(zuò)用的實驗(yàn)中(zhōng)。

 

5. 剝(bāo)奪杆睡眠剝(bāo)奪(duó)法

 

在標準實驗室(shì)籠中(zhōng)采用間隙性(xìng)的(dí)剝奪杆掃描進(jìn)行觸覺刺(cì)激(jī)來(lái)幹擾(rǎo)自由行為的小(xiǎo)鼠。該方(fāng)法防止了人(rén)類接觸和(hé)幹(gān)預(yù)對(duì)睡(shuì)眠(mián)剝奪的影響(xiǎng)，並且在整個(gè)睡(shuì)眠剝奪(duó)過(guò)程期間*小化身體活動(dòng)。此外(wài)，該(gāi)程序準(zhǔn)確且(qiě)可預測。實驗室動物從小都是在飼養(yǎng)籠(lóng)中(zhōng)長大(dà)，基於實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)籠使(shǐ)得動物(wù)能(néng)夠保(bǎo)持在(zài)正常(cháng)的社會(huì)環境中(zhōng)實施了一種相(xiāng)對無壓力的方(fāng)法來誘(yòu)導(dǎo)動(dòng)物睡眠(mián)剝奪模(mó)型，從(cóng)而(ér)避(bì)免了(liǎo)外(wài)界(jiè)環(huán)境(jìng)及其他(tā)因(yīn)素(sù)對睡(shuì)眠剝奪的影響。此(cǐ)外，基(jī)於(yú)飼(sì)養籠式的睡眠剝奪(duó)儀易(yì)於(yú)組裝(zhuāng)和清洗(xǐ)，設計(jì)更(gēng)加(jiā)地人性(xìng)化。